ビジネス展開への試み

書籍やインターネット等で検索可能なウイルス病に典型的な病徴が観察される場合を除くと，植物のウイルス病はその他の病虫害との区別が容易ではありません。通常は，肉眼やルーペ，顕微鏡を使って害虫や他の病原体が認められない場合に，ウイルス病，または栄養障害や薬害などを疑い，それらを区別するためにウイルス診断を行うことになります。

今回皆様に体験いただいた検査キットは試作段階のものですが、最終的には農業現場でのカンキツウイルス検査に利用できればと考えています。

今回用意したサンプルは、乳棒乳鉢を用いて葉をバッファー中ですりつぶしたものですが、農業現場での使用を考えた場合、チューブの中で棒などを使ってすりつぶすことでサンプルを調製する方法にしたいと考えています。

現在、評価中ですが、見た目で症状がない葉でも陽性判定が出る場合があります。今後、PCR検査を同時に行い、どのくらいのウイルス量で陽性になるのかについて確認していきたいと考えています。

現在、評価中で、まだデータは得られていません。一般的なイムノクロマト法を利用した検査キットの有効期限は１年〜２年ほどです。私たちのキットも同程度ではないかと考えています。

一般的な考えとしては、検出できるウイルスの種類を増やせば増やすほど反応性が下がることになります。しかし、今回の検査キットに用いた抗体は、カンキツモザイクウイルスを高感度で検出できる抗体を選抜しましたので、カンキツモザイクウイルスに対する検出感度が高い検査キットとなっています。カンキツモザイクウイルスの近縁ウイルスに関しては、カンキツモザイクウイルスよりは検出感度が高くはないと考えています。

植物は動物と違い、抗体を作ることは出来ません。しかし、植物はウイルスに対する抵抗性を高めるタンパク質を作り、ウイルスの増殖を抑制したり、ウイルスが植物個体全体に広がらない無い様にすることができます。予め弱毒性ウイルスを感染させておくと、植物のウイルス抵抗性応答が素早く確実に起こるため、非常に有効な手段といえます。ただし、ウイルスを弱毒化することが難しいため、非常に限られたウイルスにのみ利用できる手段となっています。

今回検査キットの開発のために作成した抗体は、カンキツウイルスのカプシドタンパク質の一部分の配列に相当するペプチドをウサギに接種して単離したものになります。

約150kDaです。一般的な抗体とほぼ同じ大きさとなっています。

今回のキットは試作段階のモノで、実際の現場でどの程度の反応性が得られるかを評価することを目的としていました。得られた結果を元に、今後、抗体の量を上げたり、発色粒子の種類や大きさを変えるなどにより、改良していきたいと考えています。また、今回判定ラインが薄かった理由として、ウイルス量の多い感染葉サンプルを用意できなかったということもあります。